基因点突变细胞
获取免费计划bet36基因全新研发Bingo?先导编辑基因定点突变平台,可提供精准、高效的基因定点突变细胞定制效劳。Bingo?平台是基于现在最高效、最清静的先导编辑PE (Prime Editing) 基因定点突变手艺,bet36基因凝聚十多年基因编辑履历,在上千例基因编辑CRO项目履历中总结、优化、提升,乐成率远超古板基因定点突变系统。主要体现为以下五大优化。
效劳详情
人类有凌驾75000 种疾病和遗传变异相关,其中单碱基突变占得比例最大,但现在大大都仍没有好的治疗要领。不管是遗传病照旧癌症的检测与治疗,都需要点突变的细胞株。
现在较普遍的点突变要领是基于CRISPR-Cas的基因编辑手艺,该手艺可以在特定基因组位置爆发双链断裂(double-strandDNA breaks,DSBs)后,使得外源准确供体基因序列得以通过同源重组的方法整合基因组,抵达基因编辑的目的。然而,CRISPR-Cas手艺一直饱受脱靶效应困扰,并且引入双链断裂也造成多余副产品、基因转座等问题,限制其在基因治疗领域施展更主要的作用。
现在无需双链断裂的基因编辑手艺仅能实现4种单碱基编辑(C→T, G→A, A→G, T→C),仍有8种编辑不可实现(C→A, C→G, G→C, G→T, A→C, A→T, T→A, T→G)。先导编辑系统借助Cas、反转录酶和特殊设计的gRNA(prime editing guide RNA ,pegRNA),突破了上述局限性,实现准确性和泛用性共存的基因编辑。
bet36基因提供的BingoTM基因定点突变细胞定制效劳正是基于先导编辑系统,可以准确、高效地定点改变细胞靶序列,资助推进疾病研究和治疗生长。
● 细胞类型:细胞系、干细胞等可转染、无限传代的细胞,bet36基因具有300+种细胞作育履历,点击审查艾迪基因细胞清单
● 价钱:定制价钱因细胞种类、项目难度而异,接待免费咨询:020-3223-8856或18102225074(微信同号)
● 周期:项目周期快至10周,基因突变细胞系现货只需一周
效劳种类:
为什么选择bet36基因?
效劳流程
1. 设计一段带有转录模板(携带想要的基因信息)和须要Prime Binding Site(PBS)的 PE 编辑专用 gRNA——pegRNA。
2. Cas9切口酶在pegRNA上的sgRNA序列指引下,切割DNA单链,pegRNA 3′-端的PBS(引物团结序列)可以与切切断点前的互补序列识别配对
3. 逆转录酶(M-MLV RT)以pegRNA上PBS序列后的人工设计的模板序列为模板举行逆转录,将目的序列直接聚合到切口的DNA链上
4. 编辑后的DNA 双链延伸出一段特殊新合成的 DNA Flap,启动细胞自有的3‘flap-5’flap equilibration 机制,将 DNA 原有的片断切除。
5.不匹配的DNA 双链通过错配修复(mismatch repair,MMR)机制,把非编辑链修复,整个编辑历程就完成了。
乐成案例
案例1:HCT116细胞CTNNB1基因定点突变,位点c.98C>T
实验效果:单克隆测序效果显示,突酿乐成